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+Streptococcus_suis 1981512 1981878 Streptococcus_suis|ORF2881 0 + +Streptococcus_suis 1981760 1982099 Streptococcus_suis|ORF2882 0 - +Streptococcus_suis 1982179 1982602 Streptococcus_suis|ORF2883 0 + +Streptococcus_suis 1982325 1982631 Streptococcus_suis|ORF2884 0 - +Streptococcus_suis 1982644 1983916 Streptococcus_suis|ORF2885 0 - +Streptococcus_suis 1983950 1984655 Streptococcus_suis|ORF2886 0 + +Streptococcus_suis 1983992 1984349 Streptococcus_suis|ORF2887 0 - +Streptococcus_suis 1984655 1985540 Streptococcus_suis|ORF2888 0 + +Streptococcus_suis 1985996 1986602 Streptococcus_suis|ORF2889 0 - +Streptococcus_suis 1986682 1987480 Streptococcus_suis|ORF2890 0 - +Streptococcus_suis 1987469 1988357 Streptococcus_suis|ORF2891 0 - +Streptococcus_suis 1988287 1989124 Streptococcus_suis|ORF2892 0 - +Streptococcus_suis 1989120 1989669 Streptococcus_suis|ORF2893 0 - +Streptococcus_suis 1989669 1990539 Streptococcus_suis|ORF2894 0 - +Streptococcus_suis 1990608 1991928 Streptococcus_suis|ORF2895 0 - +Streptococcus_suis 1991888 1993154 Streptococcus_suis|ORF2896 0 - +Streptococcus_suis 1993212 1993599 Streptococcus_suis|ORF2897 0 + +Streptococcus_suis 1993568 1994696 Streptococcus_suis|ORF2898 0 + +Streptococcus_suis 1994967 1996464 Streptococcus_suis|ORF2899 0 - +Streptococcus_suis 1996680 1997781 Streptococcus_suis|ORF2900 0 - +Streptococcus_suis 1998012 1998933 Streptococcus_suis|ORF2901 0 + +Streptococcus_suis 1998922 2000620 Streptococcus_suis|ORF2902 0 + +Streptococcus_suis 1999704 2000052 Streptococcus_suis|ORF2903 0 - +Streptococcus_suis 1999973 2000306 Streptococcus_suis|ORF2904 0 + +Streptococcus_suis 2000501 2000855 Streptococcus_suis|ORF2905 0 + +Streptococcus_suis 2000887 2003506 Streptococcus_suis|ORF2906 0 + +Streptococcus_suis 2003906 2004614 Streptococcus_suis|ORF2907 0 - +Streptococcus_suis 2004614 2005157 Streptococcus_suis|ORF2908 0 - +Streptococcus_suis 2005222 2006464 Streptococcus_suis|ORF2909 0 + +Streptococcus_suis 2006518 2007289 Streptococcus_suis|ORF2910 0 + diff -r 64e67f172188 -r 705a2e2df7fb test-data/get_orf_input.t11_bed_out.bed --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/test-data/get_orf_input.t11_bed_out.bed Thu Jul 30 12:35:31 2015 -0400 @@ -0,0 +1,6 @@ +alpha 67 331 alpha|CDS1 0 + +alpha 71 326 alpha|CDS2 0 + +alpha 75 336 alpha|CDS3 0 + +beta 68 332 beta|CDS1 0 + +beta 72 327 beta|CDS2 0 + +beta 76 337 beta|CDS3 0 + diff -r 64e67f172188 -r 705a2e2df7fb test-data/get_orf_input.t11_open_bed_out.bed --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/test-data/get_orf_input.t11_open_bed_out.bed Thu Jul 30 12:35:31 2015 -0400 @@ -0,0 +1,7 @@ +alpha 67 331 alpha|CDS1 0 + +alpha 71 326 alpha|CDS2 0 + +alpha 75 336 alpha|CDS3 0 + +beta 68 332 beta|CDS1 0 + +beta 72 327 beta|CDS2 0 + +beta 76 337 beta|CDS3 0 + +beta 333 408 beta|CDS4 0 + diff -r 64e67f172188 -r 705a2e2df7fb test-data/get_orf_input.t1_bed_out.bed --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/test-data/get_orf_input.t1_bed_out.bed Thu Jul 30 12:35:31 2015 -0400 @@ -0,0 +1,3 @@ +alpha 67 331 alpha|CDS1 0 + +alpha 71 326 alpha|CDS2 0 + +alpha 75 336 alpha|CDS3 0 + diff -r 64e67f172188 -r 705a2e2df7fb tools/get_orfs_or_cdss/README.rst --- a/tools/get_orfs_or_cdss/README.rst Thu Nov 21 10:47:53 2013 -0500 +++ b/tools/get_orfs_or_cdss/README.rst Thu Jul 30 12:35:31 2015 -0400 @@ -1,7 +1,7 @@ Galaxy tool to find ORFs or simple CDSs ======================================= -This tool is copyright 2011-2013 by Peter Cock, The James Hutton Institute +This tool is copyright 2011-2015 by Peter Cock, The James Hutton Institute (formerly SCRI, Scottish Crop Research Institute), UK. All rights reserved. See the licence text below (MIT licence). @@ -31,21 +31,23 @@ There are just two files to install to use this tool from within Galaxy: -* get_orfs_or_cdss.py (the Python script) -* get_orfs_or_cdss.xml (the Galaxy tool definition) +* ``get_orfs_or_cdss.py`` (the Python script) +* ``get_orfs_or_cdss.xml`` (the Galaxy tool definition) -The suggested location is in a dedicated tools/get_orfs_or_cdss folder. +The suggested location is in a dedicated ``tools/get_orfs_or_cdss`` folder. -You will also need to modify the tools_conf.xml file to tell Galaxy to offer the +You will also need to modify the ``tools_conf.xml`` file to tell Galaxy to offer the tool. One suggested location is in the filters section. Simply add the line:: -You will also need to install Biopython 1.54 or later. If you want to run -the unit tests, include this line in tools_conf.xml.sample and the sample -FASTA files under the test-data directory. Then:: +You will also need to install Biopython 1.65 or later (slightly older versions +should be fine, but will not have the latest NCBI genetic code tables). - ./run_functional_tests.sh -id get_orfs_or_cdss +If you wish to run the unit tests, also move/copy the ``test-data/`` files +under Galaxy's ``test-data/`` folder. Then:: + + ./run_tests.sh -id get_orfs_or_cdss That's it. @@ -68,6 +70,11 @@ - Updated citation information (Cock et al. 2013). - Renamed folder and adopted README.rst naming. v0.0.6 - Corrected automated dependency defintion. +v0.0.7 - Tool definition now embeds citation information. +v0.1.0 - Tool now outputs BED formatted calls (by @erasche, Eric Rasche). + - Using ``optparse`` for the Python command line API (Eric Rasche). + - Added NCBI genetic code table 24, Pterobranchia Mitochondrial. +v0.1.1 - Reorder XML elements (internal change only). ======= ====================================================================== @@ -80,28 +87,41 @@ Development has now moved to a dedicated GitHub repository: https://github.com/peterjc/pico_galaxy/tree/master/tools -For making the "Galaxy Tool Shed" http://toolshed.g2.bx.psu.edu/ tarball use -the following command from the Galaxy root folder:: +For pushing a release to the test or main "Galaxy Tool Shed", use the following +Planemo commands (which requires you have set your Tool Shed access details in +``~/.planemo.yml`` and that you have access rights on the Tool Shed):: - $ tar -czf get_orfs_or_cdss.tar.gz tools/get_orfs_or_cdss/README.rst tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.* tools/get_orfs_or_cdss/tool_dependencies.xml test-data/get_orf_input*.fasta test-data/Ssuis.fasta + $ planemo shed_update --shed_target testtoolshed --check_diff ~/repositories/pico_galaxy/tools/get_orfs_or_cdss/ + ... -Check this worked:: +or:: - $ tar -tzf get_orfs_or_cdss.tar.gz - tools/get_orfs_or_cdss/README.rst - tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.py - tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.xml - tools/get_orfs_or_cdss/tool_dependencies.xml - test-data/get_orf_input.fasta + $ planemo shed_update --shed_target toolshed --check_diff ~/repositories/pico_galaxy/tools/get_orfs_or_cdss/ + ... + +To just build and check the tar ball, use:: + + $ planemo shed_upload --tar_only ~/repositories/pico_galaxy/tools/get_orfs_or_cdss/ + ... + $ tar -tzf shed_upload.tar.gz + test-data/Ssuis.fasta + test-data/get_orf_input.Suis_ORF.bed test-data/get_orf_input.Suis_ORF.nuc.fasta test-data/get_orf_input.Suis_ORF.prot.fasta + test-data/get_orf_input.fasta + test-data/get_orf_input.t11_bed_out.bed test-data/get_orf_input.t11_nuc_out.fasta + test-data/get_orf_input.t11_open_bed_out.bed test-data/get_orf_input.t11_open_nuc_out.fasta test-data/get_orf_input.t11_open_prot_out.fasta test-data/get_orf_input.t11_prot_out.fasta + test-data/get_orf_input.t1_bed_out.bed test-data/get_orf_input.t1_nuc_out.fasta test-data/get_orf_input.t1_prot_out.fasta - test-data/Ssuis.fasta + tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.py + tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.xml + tools/get_orfs_or_cdss/README.rst + tools/get_orfs_or_cdss/tool_dependencies.xml Licence (MIT) diff -r 64e67f172188 -r 705a2e2df7fb tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.py --- a/tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.py Thu Nov 21 10:47:53 2013 -0500 +++ b/tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.py Thu Jul 30 12:35:31 2015 -0400 @@ -1,12 +1,8 @@ #!/usr/bin/env python """Find ORFs in a nucleotide sequence file. -get_orfs_or_cdss.py $input_fasta $input_format $table $ftype $ends $mode $min_len $strand $out_nuc_file $out_prot_file - -Takes ten command line options, input sequence filename, format, genetic -code, CDS vs ORF, end type (open, closed), selection mode (all, top, one), -minimum length (in amino acids), strand (both, forward, reverse), output -nucleotide filename, and output protein filename. +For more details, see the help text and argument descriptions in the +accompanying get_orfs_or_cdss.xml file which defines a Galaxy interface. This tool is a short Python script which requires Biopython. If you use this tool in scientific work leading to a publication, please cite the @@ -19,67 +15,90 @@ This script is copyright 2011-2013 by Peter Cock, The James Hutton Institute (formerly SCRI), Dundee, UK. All rights reserved. -See accompanying text file for licence details (MIT/BSD style). +See accompanying text file for licence details (MIT licence). -This is version 0.0.3 of the script. +This is version 0.1.0 of the script. """ import sys import re +from optparse import OptionParser -if "-v" in sys.argv or "--version" in sys.argv: - print "v0.0.3" - sys.exit(0) - -def stop_err(msg, err=1): +def sys_exit(msg, err=1): sys.stderr.write(msg.rstrip() + "\n") sys.exit(err) +usage = """Use as follows: + +$ python get_orfs_or_cdss.py -i genome.fa -f fasta --table 11 -t CDS -e open -m all -s both --on cds.nuc.fa --op cds.protein.fa --ob cds.bed +""" + try: from Bio.Seq import Seq, reverse_complement, translate from Bio.SeqRecord import SeqRecord from Bio import SeqIO from Bio.Data import CodonTable except ImportError: - stop_err("Missing Biopython library") + sys_exit("Missing Biopython library") + -#Parse Command Line -try: - input_file, seq_format, table, ftype, ends, mode, min_len, strand, out_nuc_file, out_prot_file = sys.argv[1:] -except ValueError: - stop_err("Expected ten arguments, got %i:\n%s" % (len(sys.argv)-1, " ".join(sys.argv))) +parser = OptionParser(usage=usage) +parser.add_option('-i', '--input', dest='input_file', + default=None, help='Input fasta file', + metavar='FILE') +parser.add_option('-f', '--format', dest='seq_format', + default='fasta', help='Sequence format (e.g. fasta, fastq, sff)') +parser.add_option('--table', dest='table', + default=1, help='NCBI Translation table', type='int') +parser.add_option('-t', '--ftype', dest='ftype', type='choice', + choices=['CDS', 'ORF'], default='ORF', + help='Find ORF or CDSs') +parser.add_option('-e', '--ends', dest='ends', type='choice', + choices=['open', 'closed'], default='closed', + help='Open or closed. Closed ensures start/stop codons are present') +parser.add_option('-m', '--mode', dest='mode', type='choice', + choices=['all', 'top', 'one'], default='all', + help='Output all ORFs/CDSs from sequence, all ORFs/CDSs ' + 'with max length, or first with maximum length') +parser.add_option('--min_len', dest='min_len', + default=10, help='Minimum ORF/CDS length', type='int') +parser.add_option('-s', '--strand', dest='strand', type='choice', + choices=['forward', 'reverse', 'both'], default='both', + help='Strand to search for features on') +parser.add_option('--on', dest='out_nuc_file', + default=None, help='Output nucleotide sequences, or - for STDOUT', + metavar='FILE') +parser.add_option('--op', dest='out_prot_file', + default=None, help='Output protein sequences, or - for STDOUT', + metavar='FILE') +parser.add_option('--ob', dest='out_bed_file', + default=None, help='Output BED file, or - for STDOUT', + metavar='FILE') +parser.add_option('-v', '--version', dest='version', + default=False, action='store_true', + help='Show version and quit') -try: - table = int(table) -except ValueError: - stop_err("Expected integer for genetic code table, got %s" % table) +options, args = parser.parse_args() + +if options.version: + print "v0.1.0" + sys.exit(0) try: - table_obj = CodonTable.ambiguous_generic_by_id[table] + table_obj = CodonTable.ambiguous_generic_by_id[options.table] except KeyError: - stop_err("Unknown codon table %i" % table) - -if ftype not in ["CDS", "ORF"]: - stop_err("Expected CDS or ORF, got %s" % ftype) - -if ends not in ["open", "closed"]: - stop_err("Expected open or closed for end treatment, got %s" % ends) + sys_exit("Unknown codon table %i" % options.table) -try: - min_len = int(min_len) -except ValueError: - stop_err("Expected integer for min_len, got %s" % min_len) - -if seq_format.lower()=="sff": +if options.seq_format.lower()=="sff": seq_format = "sff-trim" -elif seq_format.lower()=="fasta": +elif options.seq_format.lower()=="fasta": seq_format = "fasta" -elif seq_format.lower().startswith("fastq"): +elif options.seq_format.lower().startswith("fastq"): seq_format = "fastq" else: - stop_err("Unsupported file type %r" % seq_format) + sys_exit("Unsupported file type %r" % options.seq_format) -print "Genetic code table %i" % table -print "Minimum length %i aa" % min_len +print "Genetic code table %i" % options.table +print "Minimum length %i aa" % options.min_len #print "Taking %s ORF(s) from %s strand(s)" % (mode, strand) starts = sorted(table_obj.start_codons) @@ -102,10 +121,10 @@ n = s[start:] assert len(n) % 3 == 0, "%s is len %i" % (n, len(n)) if strict: - t = translate(n, table, cds=True) + t = translate(n, options.table, cds=True) else: #Use when missing stop codon, - t = "M" + translate(n[3:], table, to_stop=True) + t = "M" + translate(n[3:], options.table, to_stop=True) return start, n, t return None, None, None @@ -117,15 +136,15 @@ if index % 3 != 0: continue n = s[start:index] - if ftype=="CDS": + if options.ftype=="CDS": offset, n, t = start_chop_and_trans(n) else: offset = 0 - t = translate(n, table, to_stop=True) - if n and len(t) >= min_len: + t = translate(n, options.table, to_stop=True) + if n and len(t) >= options.min_len: yield start + offset, n, t start = index - if ends == "open": + if options.ends == "open": #No stop codon, Biopython's strict CDS translate will fail n = s[start:] #Ensure we have whole codons @@ -135,14 +154,14 @@ n = n[:-1] if len(n) % 3: n = n[:-1] - if ftype=="CDS": + if options.ftype=="CDS": offset, n, t = start_chop_and_trans(n, strict=False) else: offset = 0 - t = translate(n, table, to_stop=True) - if n and len(t) >= min_len: + t = translate(n, options.table, to_stop=True) + if n and len(t) >= options.min_len: yield start + offset, n, t - + def get_all_peptides(nuc_seq): """Returns start, end, strand, nucleotides, protein. @@ -153,12 +172,12 @@ #rather than making a list and sorting? answer = [] full_len = len(nuc_seq) - if strand != "reverse": + if options.strand != "reverse": for frame in range(0,3): for offset, n, t in break_up_frame(nuc_seq[frame:]): start = frame + offset #zero based answer.append((start, start + len(n), +1, n, t)) - if strand != "forward": + if options.strand != "forward": rc = reverse_complement(nuc_seq) for frame in range(0,3) : for offset, n, t in break_up_frame(rc[frame:]): @@ -184,24 +203,31 @@ raise StopIteration yield values[0] -if mode == "all": +if options.mode == "all": get_peptides = get_all_peptides -elif mode == "top": +elif options.mode == "top": get_peptides = get_top_peptides -elif mode == "one": +elif options.mode == "one": get_peptides = get_one_peptide in_count = 0 out_count = 0 -if out_nuc_file == "-": +if options.out_nuc_file == "-": out_nuc = sys.stdout else: - out_nuc = open(out_nuc_file, "w") -if out_prot_file == "-": + out_nuc = open(options.out_nuc_file, "w") + +if options.out_prot_file == "-": out_prot = sys.stdout else: - out_prot = open(out_prot_file, "w") -for record in SeqIO.parse(input_file, seq_format): + out_prot = open(options.out_prot_file, "w") + +if options.out_bed_file == "-": + out_bed = sys.stdout +else: + out_bed = open(options.out_bed_file, "w") + +for record in SeqIO.parse(options.input_file, seq_format): for i, (f_start, f_end, f_strand, n, t) in enumerate(get_peptides(str(record.seq).upper())): out_count += 1 if f_strand == +1: @@ -210,14 +236,18 @@ loc = "complement(%i..%i)" % (f_start+1, f_end) descr = "length %i aa, %i bp, from %s of %s" \ % (len(t), len(n), loc, record.description) - r = SeqRecord(Seq(n), id = record.id + "|%s%i" % (ftype, i+1), name = "", description= descr) - t = SeqRecord(Seq(t), id = record.id + "|%s%i" % (ftype, i+1), name = "", description= descr) + fid = record.id + "|%s%i" % (options.ftype, i+1) + r = SeqRecord(Seq(n), id = fid, name = "", description= descr) + t = SeqRecord(Seq(t), id = fid, name = "", description= descr) SeqIO.write(r, out_nuc, "fasta") SeqIO.write(t, out_prot, "fasta") + out_bed.write('\t'.join(map(str,[record.id, f_start, f_end, fid, 0, '+' if f_strand == +1 else '-'])) + '\n') in_count += 1 if out_nuc is not sys.stdout: out_nuc.close() if out_prot is not sys.stdout: out_prot.close() +if out_bed is not sys.stdout: + out_bed.close() -print "Found %i %ss in %i sequences" % (out_count, ftype, in_count) +print "Found %i %ss in %i sequences" % (out_count, options.ftype, in_count) diff -r 64e67f172188 -r 705a2e2df7fb tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.xml --- a/tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.xml Thu Nov 21 10:47:53 2013 -0500 +++ b/tools/get_orfs_or_cdss/get_orfs_or_cdss.xml Thu Jul 30 12:35:31 2015 -0400 @@ -1,18 +1,18 @@ - + e.g. to get peptides from ESTs - biopython + biopython Bio - get_orfs_or_cdss.py --version - -get_orfs_or_cdss.py $input_file $input_file.ext $table $ftype $ends $mode $min_len $strand $out_nuc_file $out_prot_file - + get_orfs_or_cdss.py --version + +get_orfs_or_cdss.py -i $input_file -f $input_file.ext --table $table -t $ftype -e $ends -m $mode --min_len $min_len -s $strand --on $out_nuc_file --op $out_prot_file --ob $out_bed_file + @@ -33,6 +33,7 @@ + @@ -49,7 +50,7 @@ - + @@ -58,6 +59,7 @@ + @@ -70,6 +72,7 @@ + @@ -80,7 +83,8 @@ - + + @@ -92,6 +96,7 @@ + @@ -103,6 +108,7 @@ + @@ -134,7 +140,7 @@ potential start codon will be used, giving the longest possible CDS within each ORF, and thus the longest possible protein sequence. This is useful for things like BLAST or domain searching, but since this may not be the -correct start codon may not be appropriate for signal peptide detection +correct start codon, it may not be appropriate for signal peptide detection etc. **Example Usage** @@ -145,7 +151,7 @@ encode one protein as a single ORF/CDS, which you wish to extract (and perhaps translate into amino acids). -If your RNS-Seq data was strand specific, and assembled taking this into +If your RNA-Seq data was strand specific, and assembled taking this into account, you should only search for ORFs/CDSs on the forward strand. **Citation** @@ -168,4 +174,8 @@ This tool is available to install into other Galaxy Instances via the Galaxy Tool Shed at http://toolshed.g2.bx.psu.edu/view/peterjc/get_orfs_or_cdss + + 10.7717/peerj.167 + 10.1093/bioinformatics/btp163 + diff -r 64e67f172188 -r 705a2e2df7fb tools/get_orfs_or_cdss/tool_dependencies.xml --- a/tools/get_orfs_or_cdss/tool_dependencies.xml Thu Nov 21 10:47:53 2013 -0500 +++ b/tools/get_orfs_or_cdss/tool_dependencies.xml Thu Jul 30 12:35:31 2015 -0400 @@ -1,6 +1,6 @@ - - + +