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author petr-novak
date Fri, 08 Dec 2017 09:57:17 -0500
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files README.org __init__.py __pycache__/long2short.cpython-34.pyc __pycache__/long2short.cpython-35.pyc __pycache__/long2short.cpython-36.pyc galaxy_integration.org long2short.py long_reads_sampling.py long_reads_sampling.xml long_reads_sampling.xml.backup test test-data/read_10k_ALL_oxford_nanopore_sample test-data/sampled.fasta tmp/test tmp/test_output tmp/test_sampled
diffstat 14 files changed, 146544 insertions(+), 0 deletions(-) [+]
line wrap: on
line diff
--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/README.org	Fri Dec 08 09:57:17 2017 -0500
@@ -0,0 +1,73 @@
+#+TITLE:  Sequence Read Simulator
+#+AUTHOR: Petr Novak
+
+Create pseudo short reads from long reads (Illumina Like). 
+
+* Requirements
+- python version > 3.4
+- biopython
+
+* Available tools
+** long_reads_sampling
+#+BEGIN_EXAMPLE
+
+usage: long_reads_sampling.py [-h] [-i INPUT] [-o OUTPUT] [-l TOTAL_LENGTH]
+                              [-s SEED]
+
+Create sample of long reads, instead of setting number of reads to be sampled,
+total length of all sampled sequences is defined
+
+optional arguments:
+  -h, --help            show this help message and exit
+  -i INPUT, --input INPUT
+                        file with long reads in fasta format (default: None)
+  -o OUTPUT, --output OUTPUT
+                        Output file name (default: None)
+  -l TOTAL_LENGTH, --total_length TOTAL_LENGTH
+                        total length of sampled output (default: None)
+  -s SEED, --seed SEED  random number generator seed (default: 123)
+#+END_EXAMPLE
+
+** long2short
+#+BEGIN_EXAMPLE
+usage: long2short.py [-h] [-i INPUT] [-o OUTPUT] [-cov COVERAGE]
+                     [-L INSERT_LENGTH] [-l READ_LENGTH]
+
+Creates pseudo short reads from long oxford nanopore reads
+
+optional arguments:
+  -h, --help            show this help message and exit
+  -i INPUT, --input INPUT
+                        file with long reads in fasta format (default: None)
+  -o OUTPUT, --output OUTPUT
+                        Output file name (default: None)
+  -cov COVERAGE, --coverage COVERAGE
+                        samplig coverage (default: 0.1)
+  -L INSERT_LENGTH, --insert_length INSERT_LENGTH
+                        length of insert, must be longer than read length
+                        (default: 600)
+  -l READ_LENGTH, --read_length READ_LENGTH
+                        read length (default: 100)
+
+#+END_EXAMPLE
+resulting reads in fasta format has names which include following information:
+ - original long read name index
+ - position of pseudo forward read in long reads
+forward a reverse reads are interlaced a reverse reads are reverse complement of original long sequence
+example outut:
+#+BEGIN_EXAMPLE
+>1_1_101_f
+TGGTACTTGCGGTTACGTATTGCTAGCTAGTCTCCATTTGTCCGTTGGTCTTAGGTGATT
+TTCCAAGCTTTGTGTGTAAATGTAAGGATCCTCATTTGTA
+>1_1_101_r
+GTTTTGTTATCGTGATCCACAGATCAGAAGATATCGCCGCTCACCTGTCAATTAATCTTA
+ACTTAATGTACACTAGGGTTTTGGTTTTAACTGCTATCTT
+>1_2001_2101_f
+CTGAGTTGGGCAACATAGCCGACAAATTTGAACAATAAGCCGGTCCAGCCTTCTTTCTCA
+GCTGATACATGAAACAAATCAAAGGAGCATTGTAAAGGCG
+>1_2001_2101_r
+TTTTGAATGATGGCACTACCGTGATCAAGGACGATGGTCTCCGTTCACTCGCTTTTGTTG
+TACGTTCTCTATGAACTTGGTTTCTTTGCATTCGGTTCTT
+>1_4001_4101_f
+GAAGTTGAAGGAACATTTGGAAAGGTGTGTGAAGACTAATTTGGTCT
+#+END_EXAMPLE
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Binary file __pycache__/long2short.cpython-36.pyc has changed
--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/galaxy_integration.org	Fri Dec 08 09:57:17 2017 -0500
@@ -0,0 +1,41 @@
+#+TITLE: Building galaxy tools
+#+BEGIN_SRC sh
+# require planemo
+if [ -e "long_reads_sampling.xml" ]
+then
+   echo "backing up original file"
+   cp long_reads_sampling.xml long_reads_sampling.xml.backup
+fi
+planemo tool_init --force  --id 'long_reads_sampling' \
+--name 'Create sample of long reads' \
+--requirement biopython \
+--example_command 'long_reads_sampling.py -i input_seq.fasta -o output_seq.fasta -l total_length -s seed' \
+--example_input 'input_seq.fasta' \
+--example_output 'output_seq.fasta'
+
+#+END_SRC
+
+#+RESULTS:
+| backing         | up      | original | file                         |
+| Tool | written | to       | long_reads_sampling.xml |
+
+file must be manually edited
+
+# create toolshed configuration
+#+BEGIN_SRC bash
+planemo shed_init --name=long_reads_sampling \
+                    --owner=repeatexplorer \
+                    --description=long_reads_sampling \
+                    --long_description="Create sample of long reads" \
+                    --category="Fasta Manipulation"
+planemo shed_lint --tools
+#+END_SRC
+
+#+RESULTS:
+
+# creating repository - once
+
+#+BEGIN_SRC bash
+# it requires planemo server running!
+planemo shed_create --shed_target local
+#+END_SRC
--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/long2short.py	Fri Dec 08 09:57:17 2017 -0500
@@ -0,0 +1,150 @@
+#!/usr/bin/env python3
+import argparse
+import sys
+from argparse import ArgumentDefaultsHelpFormatter
+from collections import namedtuple
+from collections import OrderedDict
+from Bio import SeqIO
+
+SEQ_FORMAT = "fasta"
+# Default sampling, used on argparse:
+DEFAULT_READ_LENGTH = 200
+DEFAULT_INSERT_LENGTH = 700
+DEFAULT_COVERAGE = 0.1
+
+Sequences_summary = namedtuple('Fasta_summary',
+                               ['total_length', 'number_of_sequence',
+                                'id_length', 'file_path', 'format'])
+
+Coordinates = namedtuple('Coordinates', "id start1 end1 start2 end2")
+
+
+def get_sequences_summary(seq_file):
+    ''' return basic characteristic of sequences '''
+    id_length = OrderedDict()
+    totat_length = 0
+    N = 0
+    for seqs in SeqIO.parse(seq_file, SEQ_FORMAT):
+        id_length[seqs.id] = len(seqs)
+        totat_length += len(seqs)
+        N += 1
+    return Sequences_summary(totat_length, N, id_length, seq_file, SEQ_FORMAT)
+
+
+def get_short_pseudoreads_position(fasta_summary, sampling_options):
+    """Return selected position on long read sequences
+    Arguments:
+    fasta_summary - namedtuple Fasta_summaty containing information about sequences
+    sampling options - namedtuple, specified how sequences should be sampled
+    Return value:
+    (sequence_id, start1, end1, start2, end2)
+    """
+    interval = int(2 * sampling_options.read_length /
+                   sampling_options.coverage)
+    for seqname, length in fasta_summary.id_length.items():
+        start_positions = range(1, length, interval)
+        for s in start_positions:
+            yield Coordinates(seqname, s, s + sampling_options.read_length,
+                              s + sampling_options.insert_length -
+                              sampling_options.read_length,
+                              s + sampling_options.insert_length)
+
+
+def extract_short_reads(summary, args):
+    '''yield short reades sampled from long reads
+    Arguments:
+    summary.. named tuple specifie sequences properties, path, length, idslist
+    args ..... Define how short sequences should be generated
+    '''
+    pos = get_short_pseudoreads_position(summary, args)
+    coords = next(pos)
+    index = 0
+    for i in SeqIO.parse(summary.file_path, summary.format):
+        index += 1
+        while True:
+            if coords.id == i.id:
+                # forward read
+                subseq_f = i[coords.start1:coords.end1]
+                subseq_f.id = "{}_{}_{}_f".format(index, coords.start1,
+                                                  coords.end1)
+                subseq_f.description = ""
+                # reverse complement read
+                subseq_r = i[coords.start2:coords.end2].reverse_complement()
+                subseq_r.id = "{}_{}_{}_r".format(index, coords.start1,
+                                                  coords.end1)
+                subseq_r.description = ""
+                # return only if sequences are long enough
+                if len(subseq_r) == args.read_length:
+                    yield subseq_f
+                    yield subseq_r
+                coords = next(pos)
+            else:
+                break
+
+
+def long2short(args):
+    '''Sample short reads from long sequences
+    args contain these attributes::
+    ------------
+    input_file   - path to file in fasta format
+    output_file  - path to output file, fasta format
+    options      - options is named tuple and specifies read length
+                   coverage, insert length, max number of sequences which will be return
+
+    '''
+    summary = get_sequences_summary(args.input.name)
+    with open(args.output.name, 'w') as f:
+        for i in extract_short_reads(summary, args):
+            SeqIO.write(i, f, SEQ_FORMAT)
+
+
+def get_args():
+    '''Parses command line arguments '''
+    description = "Creates pseudo short reads from long oxford nanopore reads"
+    parser = argparse.ArgumentParser(
+        description=description,
+        formatter_class=ArgumentDefaultsHelpFormatter)
+    parser.add_argument('-i',
+                        '--input',
+                        type=argparse.FileType('r'),
+                        help="file with long reads in fasta format")
+    parser.add_argument('-o',
+                        '--output',
+                        type=argparse.FileType('w'),
+                        help="Output file name")
+    parser.add_argument("-cov",
+                        "--coverage",
+                        type=float,
+                        default=DEFAULT_COVERAGE,
+                        help="samplig coverage")
+    parser.add_argument(
+        "-L",
+        "--insert_length",
+        type=int,
+        default=DEFAULT_INSERT_LENGTH,
+        help="length of insert, must be longer than read length")
+    parser.add_argument("-l",
+                        "--read_length",
+                        type=int,
+                        default=DEFAULT_READ_LENGTH,
+                        help="read length")
+
+    args = parser.parse_args()
+    if len(sys.argv) == 1:
+        parser.print_help()
+        sys.exit(1)
+
+    #hassert args.insert_length > args.read_length, "read length must be shorter than insert length"
+    return args
+
+
+def main():
+    '''Sample short reads from long sequences
+    Files path are passed as command line positional arguments
+                        '''
+    args = get_args()
+    long2short(args)
+
+
+if __name__ == "__main__":
+    main()
--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/long_reads_sampling.py	Fri Dec 08 09:57:17 2017 -0500
@@ -0,0 +1,98 @@
+#!/usr/bin/env python3
+import sys
+import argparse
+import random
+from argparse import ArgumentDefaultsHelpFormatter
+from Bio import SeqIO
+from long2short import get_sequences_summary
+
+
+def get_args():
+    '''Parses command line arguments '''
+    description = ("Create sample of long reads, instead"
+                   " of setting number of reads to be sampled,"
+                   "total length of all sampled sequences is defined")
+
+    parser = argparse.ArgumentParser(
+        description=description,
+        formatter_class=ArgumentDefaultsHelpFormatter)
+    parser.add_argument('-i',
+                        '--input',
+                        type=argparse.FileType('r'),
+                        help="file with long reads in fasta format")
+    parser.add_argument('-o',
+                        '--output',
+                        type=argparse.FileType('w'),
+                        help="Output file name")
+    parser.add_argument("-l",
+                        "--total_length",
+                        type=int,
+                        help="total length of sampled output")
+
+    parser.add_argument("-s",
+                        "--seed",
+                        type=int,
+                        default=123,
+                        help="random number generator seed")
+
+    args = parser.parse_args()
+    if len(sys.argv) == 1:
+        parser.print_help()
+        sys.exit(1)
+
+    return args
+
+
+def make_sequence_sample(args, seq_summary):
+    '''
+    create output sequence of required length or larger, save to fasta
+    '''
+    random.seed(args.seed)
+    print(args.seed)
+    selected_seq_id = set()
+    cummulative_length = 0
+    for seq_id in random.sample(seq_summary.id_length.keys(),
+                                seq_summary.number_of_sequence):
+        selected_seq_id.add(seq_id)
+        cummulative_length += seq_summary.id_length[seq_id]
+        if cummulative_length >= args.total_length:
+            break
+    print(selected_seq_id)
+    # to make it efficient same orger is necesary
+    selected_seq_id_ordered = [i
+                               for i in seq_summary.id_length
+                               if i in selected_seq_id]
+    curent_id = selected_seq_id_ordered.pop(0)
+    with open(args.output.name, 'w') as output_seq_file:
+        for seqs in SeqIO.parse(args.input.name, "fasta"):
+            if seqs.id == curent_id:
+                SeqIO.write(seqs, output_seq_file, "fasta")
+                try:
+                    curent_id = selected_seq_id_ordered.pop(0)
+                except IndexError:
+                    break
+
+
+def main():
+    '''
+    Create sample of longn reads, sample size is defined as total length
+    '''
+    args = get_args()
+    seq_summary = get_sequences_summary(args.input)
+    # check that total length if larger than required sampling
+    if seq_summary.total_length < args.total_length:
+        print("Input sequences total length: ",
+              seq_summary.total_length,
+              file=sys.stderr)
+        print("Required output total length: ",
+              args.total_length,
+              file=sys.stderr)
+        print("Required sequence length is larger than input data, exiting",
+              file=sys.stderr)
+        sys.exit(1)
+
+    make_sequence_sample(args, seq_summary)
+
+
+if __name__ == "__main__":
+    main()
--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/long_reads_sampling.xml	Fri Dec 08 09:57:17 2017 -0500
@@ -0,0 +1,30 @@
+<tool id="long_reads_sampling" name="Create sample of long reads" version="0.1.0">
+  <requirements>
+    <requirement type="package">biopython</requirement>
+    <requirement type="package">python3</requirement>
+  </requirements>
+  <command detect_errors="exit_code"><![CDATA[
+  python3 $__tool_directory__/long_reads_sampling.py -i "$input1" -o "$output1" -l ${total_length} -s ${seed}
+  ]]></command>
+  <inputs>
+    <param type="data" name="input1" format="fasta" label="input sequence in fasta format"/>
+    <param name="total_length" type="integer" label="Total length of sampled sequences" value="10000" />
+    <param name="seed" type="integer" label="seed for setting random number generator" value="123" />
+  </inputs>
+  <outputs>
+    <data name="output1" format="fasta" />
+  </outputs>
+  <tests>
+    <test>
+      <param name="input1" value="read_10k_ALL_oxford_nanopore_sample" />
+      <param name="total_length" value="1000000" />
+      <param name="seed" value="1234" />
+      <output name="output1" file="sampled.fasta"/>
+    </test>
+  </tests>
+  <help><![CDATA[
+  This tools is for random sampling of long reads te get specified total amount of data
+  ]]></help>
+  <citations>
+  </citations>
+</tool>
--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/long_reads_sampling.xml.backup	Fri Dec 08 09:57:17 2017 -0500
@@ -0,0 +1,19 @@
+<tool id="long_reads_sampling" name="Create sample of long reads" version="0.1.0">
+    <requirements>
+        <requirement type="package">biopython</requirement>
+    </requirements>
+    <command detect_errors="exit_code"><![CDATA[
+        long_reads_sampling.py -i "$input1" -o "$output1" -l total_length -s seed
+    ]]></command>
+    <inputs>
+        <param type="data" name="input1" format="fasta" />
+    </inputs>
+    <outputs>
+        <data name="output1" format="fasta" />
+    </outputs>
+    <help><![CDATA[
+        b'usage: long_reads_sampling.py [-h] [-i INPUT] [-o OUTPUT] [-l TOTAL_LENGTH]\n                              [-s SEED]\n\nCreate sample of long reads, instead of setting number of reads to be\nsampled,total length of all sampled sequences is defined\n\noptional arguments:\n  -h, --help            show this help message and exit\n  -i INPUT, --input INPUT\n                        file with long reads in fasta format (default: None)\n  -o OUTPUT, --output OUTPUT\n                        Output file name (default: None)\n  -l TOTAL_LENGTH, --total_length TOTAL_LENGTH\n                        total length of sampled output (default: None)\n  -s SEED, --seed SEED  random number generator seed (default: 123)\n'
+    ]]></help>
+    <citations>
+    </citations>
+</tool>
\ No newline at end of file
--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/test-data/read_10k_ALL_oxford_nanopore_sample	Fri Dec 08 09:57:17 2017 -0500
@@ -0,0 +1,100000 @@
+>CAM170313_45484_ch382_read3803_1D
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